目的 探索Derkay评分系统对幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病（juvenile onset recur rent respi ratorypapillomatosis，JORRP）患儿病变侵袭性的诊断作用。方法 回顾性分析2008年1月~2012年12月在首都医科大学附属北京同仁医院住院治疗的117例JORRP患儿的术后临床病例资料，并进行长期随访。采用皮尔逊相关系数（Pearson correlation coefficient）分析Derkay分值与手术间隔时间、年平均手术次数和总手术次数的相关性，受试者工作特征（ROC）曲线及曲线下面积（AUC）分析Derkay评分系统对JORRP患儿病变侵袭性的诊断作用。结果 Derkay评分与年平均手术次数呈中等强度正相关（r =0.588，P =0.001），与总手术次数呈弱正相关（r =0.280，P＜0.01）。ROC曲线分析结果显示，Deraky评分的最佳临界值为14.55，其AUC为0.768[95%CI（0.672，0.864）]；Derkay评分每增加1分，病程呈侵袭性的概率将增加约0.2倍[95%CI（2.237~2.645）]；Derkay评分＞14.55的患者诊断为侵袭性病变的概率是Derkay评分＜14.55的患者的10.67倍[95%CI（3.679~30.925）]。结论 Derkay评分系统在评估JORRP病情上有较大意义，Deraky评分值14.55可作为评估JORRP病变侵袭性的诊断标准值。

目的 本研究拟探究幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病（juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis，JORRP）患儿人乳头状瘤病毒（HPV）亚型与含量的长期变化情况，及其对病程的影响。方法 纳入2011年6月~2022年6月于北京同仁医院反复多次就诊、病程持续3年以上的43例JORRP患儿，收集其就诊期间的267例术中标本及留取标本时的手术时间间隔和年手术次数等临床资料，RT-PCR法检测HPV6和HPV11的DNA含量，依据临床病情特点分为缓解组（n=22）和复发组（n=21），统计分析HPV亚型及含量的变化与病情特点变化之间的相关性。结果 13例患儿出现HPV感染转阴趋势，其中缓解组11例，复发组2例，HPV感染状态转阴与病情缓解相关（χ2=6.537，P<0.05）。缓解组HPV11型转阴10例，复发组HPV11型转阴2例，组间比较转阴率差异显著（χ2=5.224，P<0.05）。经McNemar检验，缓解组HPV11的感染率降低具有统计学意义（χ2=4.08，P<0.05）。线性回归结果提示缓解组的HPV6 DNA含量与年手术次数之间存在线性关系F（1，138）=10.478（P<0.05），HPV6 DNA含量会对年手术次数产生正向影响关系。结论 JORRP患儿的HPV感染型别和病毒含量在病程中均可发生变化，均与病情存在相关性。HPV11型感染转阴者病情呈现缓解趋势，HPV6型的病毒含量与患者手术频率正相关。

目的 分别构建过表达人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）6型和11型的E6、E7癌基因的慢病毒载体，建立HPV6-E6-E7和HPV11-E6-E7基因过表达的SNU-1076喉上皮细胞系模型。方法 分别合成表达HPV6-E6-E7和HPV11-E6-E7基因的片段，构建重组慢病毒载体pHBLV-CMV-h-HPV6-E6-E7-3FLAG-ZsGreen-Puro和pHBLV-CMV-h-HPV11-E6-E7-3FLAG-ZsGreen-Puro。包装慢病毒后转染进入人喉上皮细胞系SNU-1076，经嘌呤霉素抗性筛选得到阳性克隆。采用实时定量PCR法分别检测HPV6-E6-E7和HPV11-E6-E7基因过表达的水平。结果  通过测序验证质粒构建的成功。实时荧光定量PCR的结果显示，转染HPV6-E6-E7和HPV11-E6-E7基因的SNU-1076细胞系相较于转染对照空载体的细胞系出现了明显的扩增曲线。其中HPV6-E6-E7的过表达效果为41 692倍，HPV11-
E6-E7的过表达效果为124 957倍。结论 利用慢病毒法成功分别建立了过表达HPV6-E6-E7和HPV11-E6-E7的喉上皮SNU-1076细胞系。

目的 探讨幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病 （juvenile onset recurrent respiratory papillomatosis， JORRP）患儿围手术期夜间指脉氧监测变化。方法 对34 例JORRP患儿在术前和术后分别行夜间指脉氧监测，分 析影响血氧饱和度的因素。结果 术前符合低氧血症者 为82.4%（28/34），一度呼吸困难者平均血氧饱和度（mean  oxygen saturation，MSpO2）和最低血氧饱和度（lowest  oxygen saturation，LSpO2）均高于二度呼吸困难患儿。一 度呼吸困难患儿的平均3%氧减指数（oxygen desaturation  index，ODI）[（1.09±0.79）次/h]显著低于二度呼吸困难患 儿[（2.76±2.91）次/h]。患儿术后当晚的夜间LSpO2及3% ODI均较术前无统计学意义。结论 JORRP可以导致部分 患儿出现喉源性阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征，其严 重程度与呼吸困难严重程度成正比。术后当晚由于局部黏 膜肿胀等原因，夜间LSpO2及3%ODI较术前无明显变化，因 此术后仍应密切注意患儿呼吸情况。

目的 优化复发性呼吸道乳头状瘤（recur rent respiratory papilloma，RRP）细胞在体外原代培养的条件，并检测培养不同时间点单位细胞人乳头状瘤病毒（HPV）的含量。方法 采用组织块培养法培养7例喉乳头状瘤组织，利用低速离心法和过筛网去除细胞碎片来优化培养系统，并于培养的第2、7、14天采用荧光半定量PCR法检测HPV分型及病毒的相对含量变化。结果 原代细胞培养第2天，显微镜下可见“凹空状”HPV感染的原代上皮细胞。培养第10天大部分HPV感染的原代上皮细胞出现了明显的凋亡和坏死，未被感染的、直径较小的上皮细胞开始增殖。在传代培养的第30~45天后，原代细胞逐渐衰老死亡。HPV6在离体后拷贝数迅速降低，最后完全检测不到；而HPV11虽然在离体后拷贝数出现迅速降低，但随着培养时间延长，即使细胞的状态不佳，HPV11仍然能维持着较低的拷贝数。结论 RRP原代细胞的体外培养虽可以存活30 d以上，但随着培养时间的延长，HPV含量不能随细胞增殖而稳定扩增，HPV拷贝数骤降甚至消失，尚不能作为HPV感染性肿瘤的体外研究模型。